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預固定不動難題
染色前固定不動體細胞對流式的結果危害極大
大家一般由于下列幾類緣故采用先向體細胞固定不動,隨后開展流式的試驗:便捷(許多 試驗一天沒法做了)、安全性(有生物毒性的樣版務必固定不動殺掉體細胞后開展試驗)及其胞內染色。殊不知固定不動會更改蛋白的表位,導致結果不精i確,乃至不正確。大家查看材料發(fā)覺Biolegend企業(yè)干了很多的試驗,較為了不固定不動和固定不動(4%多聚甲醛)對流式的染色結果的危害。
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解決方法
1、假如檢驗的是上述情況報表中非常容易被多聚甲醛危害的分子結構,請盡可能不必預固定不動,如需長期性保存樣版,能夠考慮到凍存單個核細胞。
2、假如檢驗的是上述情況報表中不容易受多聚甲醛危害的分子結構,能用1%多聚甲醛預固定不動保存,但FSC、SSC和瑩光抗壓強度危害很大,如需防止該類缺陷,可考慮到流式中文網(wǎng)產(chǎn)品研發(fā)的體細胞保存液(https://kdt.im/PhQvsr)。流式中文網(wǎng)的體細胞保存液沒有多聚甲醛,具備緩凝柔和的固定不動功效,合成助劑多聚甲醛代理,故保存更長期,實際效果更優(yōu),樣版:保存液=6:1~10:1,殺菌劑固體多聚甲醛代理,21~28天內檢驗均可得到 優(yōu)良的檢驗結果。
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醛基與抗原體蛋白質的羥基化學交聯(lián)產(chǎn)生羧甲基,使抗原決定簇的三維構象出現(xiàn)室內空間阻礙。分子結構間化學交聯(lián)產(chǎn)生的網(wǎng)格圖構造很有可能一部分或徹底遮蓋一些抗原決定簇,使之不可以充足曝露,可導致假陰性的上色,防城港多聚甲醛代理,危害免i疫組化結果。因而,植物生長調節(jié)劑多聚甲醛代理,4%多聚甲醛固定不動的細胞或組織試品在開展免i疫組化檢驗時,有時候必須抵抗原來開展修補,隨后才可以開展免i疫染色等事后實際操作。多聚甲醛代理
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